Coleta e transporte de amostras

25_rezeption1O IKDT realiza testes de diagnóstico para detecção de processos inflamatórios ou infecção viral de biópsias de miocardes humanos sob cumprimento rigoroso das diretrizes da FDA. O espectro de diagnóstico inclui histologia, análise imunistoquímica e ensaios de PCR para detecção de genomas virais. As biópsias miocárdicas na forma nativa ou fixa são os materiais de amostra preferidos para esses testes. Para ensaios e resultados adequados, é importante que o material submetido seja submetido a um tratamento pré-analítico bem definido.

Para as biópsias endomiocardiais devem ser utilizados um novo reagente para conservação pela temperatura ambiente. RNAlater é um reagente de armazenamento de tecido aquoso e não tóxico que estabiliza e protege o RNA celular em amostras de tecido intactas e descongeladas. RNAlater elimina a necessidade de processar imediatamente amostras de tecido ou congelar amostras em nitrogênio líquido para posterior processamento. RNAlater também é adequado para a preparação de DNA genômico, exame histológico e imuno-histoquímico. As peças de tecido podem ser colhidas e submersas em RNAlater para armazenamento sem comprometer a qualidade ou quantidade de RNA obtida após o subsequente isolamento de RNA. RNAlater pode ser adicionado a granulados celulares e até células em meio. As amostras podem então ser armazenadas congeladas ou descongeladas.

As biópsias endomiocardiais (menos de 0,5 cm em qualquer dimensão) são simplesmente submersas em aproximadamente 0,5 ml de RNAlater à temperatura ambiente. Submergir biópsias por tubo inversor 5 vezes. A solução permeia as células, estabilizando o RNA. De preferência, as amostras devem ser enviadas diretamente à temperatura ambiente para o IKDT ou armazenadas a + 4 ° C antes do transporte que pode ser realizado em um envelope acolchoado por correio convencional. Após a recepção no IKDT, a amostra será armazenada a + 4 ° C durante uma noite e depois pode ser armazenada a 4 ° C por até um mês ou a 25 ° C por até uma semana ou entre -20 e -80 ° C indefinidamente (o tecido não congela).

Nunca congelar ou tratar as biópsias por outros fixadores antes da fixação com RNAlater!

RNAlater é adequado apenas para amostras de tecido muito pequenas (biópsias). Uma peça maior (amostras de coração explantadas) devem ser divididas rapidamente em pequenas partes ou deve ser cryo-conservada em nitrogênio líquido.