Immunhistochemie

• Gewebefixierung (RNAlater) und Lagerung nach GLP/GCP
• Anfertigung von Gefrierschnitten mittels Kryomikrotom
• Antikörperfärbungen
• Fluoreszenz- und Lichtmikroskopie
• Digitale Vermessung und Auswertung gefärbter Zellen oder Gewebeabschnitte
• Befundung/Begutachtung der gefärbten Präparate inklusiver Auswertung numerischer Werte
• Digitalbilder repräsentativer Aspekte
• Archivierung der Befunde, Gewebeblöcke und Präparate nach GLP/GCP

• Färbung verschiedener Immunzellen (CD4⁺, CD8⁺)
• ARVC/D-Nachweis (Plakoglobin, Connexin 43, N-Cadherin)
• Spezialfärbungen bei Verdacht auf Speichererkrankungen: Amyloidose (Kongorot-Färbung), HCM, M.Fabry (CD77, Toluidinblau), Hämochomatose (Fe-Färbung)
• Endothelaktivierung (CD31, VCAM)
• Kollagenexpression (Col I-, Col III-, Sirius-Färbung)
• Makrophagen Differenzierung (M1, M2)

Amyloidose ist eine seltene, aber verheerende Erkrankung, die durch die Ablagerung von fehlgefalteten Proteinen als Aggregate im extrazellulären Gewebe des Körpers verursacht wird und zu einer Beeinträchtigung der Organfunktion führt. Es wurde erkannt, dass ungefähr 25 Proteine ​​Amyloidose verursachen, und dass das amyloidogene Protein die Grundlage für die derzeitige Klassifizierung ist. Es werden jedoch nur drei Amyloidoseformen im Herzmuskelgewebe gefunden: AA - Serum amyloid A, AL (Lambda and Kappa) und ATTR - Senile systemische (Herz-) Amyloidose. Eine Abklärung der Form der Amyloidose ist dringlich angeraten, da neben selteneren Formen zwischen AL-Amyloidose (z.B. bei Plasmozytom) und ATTR-Amyloidose unterschieden werden muss.
Die Endomyokardbiopsie spielt eine zentrale Rolle für die Verifizierung bzw. Subtypisierung der kardialen Amyloidose. Deren frühzeitige Diagnose und kardial ausgerichtete vielversprechende Therapieoptionen sind aktuell von großer Bedeutung und stehen zunehmend im Fokus von Studien. Im Falle einer kardialen Amyloidose zeigt sich meist eine regelmäßige Verteilung der Amyloidablagerungen, sodass das Risiko für einen „sampling error“ und damit einem falsch negativen Resultat als relativ gering einzustufen ist. Amyloid wird durch Kongorotfärbung nachgewiesen, welches unter polarisiertem Licht betrachtet eine typische apfelgrüne / gelborange Doppelbrechung aufweist.
In der Biopsie sollte quantitativ die Amyloidlast bestimmt werden, da das bioptisch gesicherte Ausmaß der Amyloidose - vor allem bei der AL-Amyloidose - von entscheidender prognostischer und therapeutischer Bedeutung ist.
Darüber hinaus ist für die Therapieauswahl die exakte Klassifikation des Amyloids entscheidend.  Diese kann durch immun-histochemische Färbungen mit hoher Sensitivität bereits in einem frühen Stadium der Erkrankung sicher erfolgen. Es gibt verlässliche Antikörper zum Nachweis der ATTR-, AL- und AA-Amyloidose, welche mehr als 99% der kardialen Amyloidosen ausmachen. Darüber hinaus konnten wir zeigen, dass eine zusätzliche Begleitentzündung prognostisch hoch relevant ist.
Im Falle des Nachweises einer ATTR-Amyloidose sollte eine genetische Untersuchung erfolgen, um eine sog. Altersamyloidose vom Wildtyp von der hereditären Form unterscheiden zu können.

Die immunhistochemische Typisierung des Amyloids kann im IKDT erfolgen.

Genetisch bedingte arrhythmogene Herzmuskel-erkrankungen, wie die arrhythmogene rechtsventrikuläre Dysplasie (ARVC), können mit Hilfe des immunhistologischen Nachweises des Expressionsprofils desmosomaler Proteine (Plakoglobin, Desmoplakin, Caderin, Connexin 43), die im Falle einer ARVC vermindert exprimiert werden bzw. fehlen, diagnostiziert werden.

Die zelluläre Abstoßung ist durch das vermehrte Auftreten von Entzündungszellen (Lymphozyten, weiße Blutzellen) im Herzmuskelgewebe gekennzeichnet. Je nach Schweregrad der Abstoßung treten diese Entzündungszellen ungeordnet oder als „Haufen“ auf und sind mit bestimmten Gewebereaktionen verbunden. Dazu gehören eine Schwellung der Herzmuskelzellen, Blutungen oder auch Zelluntergänge, die mit einer eingeschränkten Herzfunktion, Herzstolpern, Luftnot oder einem allgemeinen Krankheitsgefühl des Patienten einhergehen können.

Die antikörper-vermittelte Abstoßung ist dadurch gekennzeichnet, dass sich körpereigene Botenstoffe (z.B. Komplementfaktoren) in Form von Eiweißen in den kleinen und kleinsten Gefäßen des Herzmuskelgewebes ablagern. Diese lösen dort eine Abwehrreaktion des Körpers aus.

Eine weitere Möglichkeit zur Charakterisierung eines vorliegenden Abstoßungsprozesses ist die Beurteilung einer Vaskulopathie der kleinen Gefäße. Hierbei wird in einer gesonderten Bewertung das Verhältnis zwischen Lumenradius und der Wandstärke der Gefäße sowie das Verhältnis vom Durchmesser der Endothelzellen zur Dicke des Endotheliums analysiert.

Auch wenn die Richtlinien getreue Klassifikation keinen oder nur eine geringen Grad (ISHLT 0-1) der Abstoßung ergibt, findet sich oft parallel eine teils massive Infiltration von Entzündungszellen, die eine Ursache für eine klinische Verschlechterung des Patienten sein könnte. Ein diesbezüglicher Befund ermöglicht der Transplantationsklinik eine kurzzeitige therapeutische Intervention zur Reduktion der Entzündungszellen, zusätzlich zur Standardmedikation für Transplantierte. Neben dem oben beschriebenen Entzündungsgeschehen gibt es eine Ansammlung von Entzündungszellen, ausschließlich in der innersten Schicht des Herzmuskels, das Quilty-Phänomen. Während dies früher als Nebeneffekt der Immunsuppression angenommen wurde, wird dieser Befund heute als eine mögliche Vorstufe der zellulären Abstoßung diskutiert.